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    ELISA試劑盒操作使用時實驗室需留意這幾點

    發布時間:2022-01-24   點擊次數:193次
      ELISA試劑盒檢測原理:采用免疫熒光定量檢測技術、免疫層析法。用于檢測人體全血、血漿樣本中D-二聚體的含量。將血液樣本和樣品緩沖液在緩沖液瓶中進行混合,緩沖液中的熒光標記抗D-二聚體抗體和血液中的D-二聚體抗原結合形成抗原抗體復合物。當混合物樣本被加入到檢測卡的加樣孔后,在層析作用下沿著硝酸纖維素膜向前擴散,該復合物被固定在檢測線上的D-二聚體抗體捕獲,血液樣本中的D-二聚體越多,檢測線上聚集的復合物越多,熒光抗體的信號強度反映了被捕獲的D-二聚體數量,通過干式免疫熒光定量分析儀處理,能夠檢測血液樣本中D-二聚體的濃度。
      ELISA試劑盒操作使用時實驗室需留意這幾點:
      1. 固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方法可所以凹孔平板、試管、珠粒等?,F在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在運用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,調查其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附功能是否良好。
      2. 酶符號抗體作業濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行開始效價的滴定。然后再固定其它條件或采納“方陣法”在正式實驗系統里準確地滴定其作業濃度。
      3.酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,應留意防護。有條件者應運用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是現在較為滿意的供氫體。ELISA試劑盒底物作用一段時間后,應參與強酸或強堿以停止反應。
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