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    ELISA試劑盒該怎么選擇,掌握這五個步驟

    發布時間:2020-08-20   點擊次數:965次
      ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點在上得到了廣泛的應用,然而實驗新手們面對各種各樣、動則上上千種的ELISA試劑盒,內心應該是崩潰的。
      首先,你要明確研究種屬:
      一般來說,廠家都會在產品名稱上標明種屬,且為單詞,檢索種屬的常用語言為英文。
      如果您需對不同物種的同一因子進行定量,建議優先尋找適用于多個種屬的 ELISA 試劑盒。
      其次,要明確樣本類型:
      不同廠家驗證樣本類型不同,即使同一廠家不同試劑盒,其驗證樣本類型也不盡相同。特別是復雜的血漿樣本,根據樣本處理方式的差異,分為 EDTA 血漿、肝素抗凝血漿和檸檬酸鹽血漿,因此購買前需仔細核對。
      第三步:要會預測自己的目標因子的濃度
      一般來說,待測因子可以根據經驗或資料獲得參考的檢測范圍,且正常人與疾病狀態存在差異。如熱門炎癥因子 IL-6,正常人血清中濃度為 3.13 pg/mL,病人會顯著增高,CAR-T 回輸病人血清中的 IL-6 濃度甚至為正常人的 200 倍以上。
      因而,必要時進行樣本的稀釋及選擇合適檢測范圍的試劑盒極其重要。
      若濃度太低,可選擇高敏試劑盒;若不確定待測濃度或樣本間濃度差異較大,建議使用檢測動態范圍更寬的化學發光法ELISA試劑盒。
      如同樣為 IL-6 ELISA 試劑盒,各類型檢測范圍差異較大,需要根據實際情況選擇合適的試劑盒。
      第四步:檢查試劑盒進行過哪些質控
      質控數據在說明書中即可找到,在購買前檢查試劑盒是否進行過嚴格的質控實驗,包括批次內(Intra-Assay)及批次間(Inter-Assay)、摻入回收實驗、線性稀釋實驗及交叉反應測試等,每個數據好都看一下,確保*的結果重現性及準確性。
      第五步:確定需檢測的因子數量
      如果待測因子超過 5 個,且樣本量較小時,單因子 ELISA 檢測方法并不是選擇。
      建議考慮多因子檢測方法,如固相芯片(樣本數量一般 5 個以內,檢測指標可達上百個)及 Luminex 液相芯片方法 (檢測樣本多達 80 個,檢測指標多達 50 個)或微流控 ELISA 檢測系統 Ella。
      可節約樣本及時間成本,也可保證檢測結果準確。
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